M290/M011 Триптон-соевый агар / Соевый бульон с казеиновым переваром (триптон-соевый бульон)
Соевый бульон с казеиновым переваром (триптон-соевый бульон) в виде порошка, стерилизованного гамма-излучением (ϒ) предназначен для оценки стерильности жидкостей, применяемых в фармацевтическом производстве (методом растворения – MFT). Рекомендуется различными национальными и международными фармакопеями. Он также используется для тестирования активности антимикробных агентов методом разведения в пробирках.
Состав**:
|
Ингредиенты |
М290 |
М011G |
|
Гидролизат казеина |
15,00 |
17,00 |
|
Папаиновый перевар соевой муки |
5,00 |
3,00 |
|
Натрия хлорид |
5,00 |
5,00 |
|
Калия гидрофосфат |
– |
2,50 |
|
Глюкоза |
– |
2,50 |
|
Агар-агар |
15,00 |
– |
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2 |
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 40,0 г порошка М290 или 30,0 г порошка М011G в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. При необходимости асептично внести в предварительно остуженную до 45-50°С среду дефибринированную кровь (до 5% об/об).
Принцип и оценка результата:
В разных фармакопеях триптон-соевый бульон рекомендуют для тестов на стерильность (1, 2). Его используют также для тестов на чувствительность к антимикробным веществам методом серийных разведений (3). Пропись Триптон-соевого агара (М290) соответствует рекомендациям американской фармакопеи (1) и используется в тестах на эффективность консервации и присутствие микроорганизмов. Эту среду можно использовать для фаготипирования, колицинотипирования, потребности видов Haemophilusв факторах X и V (4). Gunn и соавт. (5) использовали эту среду с добавлением 5% крови (об/об) для изучения гемолитических реакций. Если на основе данной среду готовят шоколадный агар, на ней хорошо растут нейссерии, Haemophilusinfluenzae и т.п.
Комбинация гидролизата казеина и папаинового перевара соевой муки придает среде питательность, т.к. они являются источником аминокислот и длинноцепочечных пептидов, необходимых для роста микроорганизмов. Глюкоза и фосфат служат, соответственно, источником углевода и буфером, которые необходимы особенно в среде М011G. Хлорид натрия поддерживает оптимальное осмотическое давление в обеих средах.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М290).
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-желтый цвет, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках или чашках Петри формируется гель. Если в среду добавляется кровь, она становится вишнево-красной.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы М290 (4,0% вес/об) или М011G (3,0% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС) |
Рост |
Рост |
Гемолиз |
|
Candida albicans (10231) |
Обильный |
Обильный |
– |
|
Staphylococcusaureus (25923) |
Обильный |
Обильный |
b |
|
Streptococcuspyogenes(19615) |
Хороший или обильный |
Обильный |
b |
|
Bacillus subtilis (6633) |
Обильный |
Обильный |
Отсутствует |
|
Bacteroidesvulgatus(8482) |
Обильный |
Обильный |
Отсутствует |
|
Neisseria meningitidis (13090) |
Обильный |
Обильный |
Отсутствует |
Примечание: рост на среде М290
